還原型谷胱gan肽(GSH)的亞細胞檢測和定位對于了解氧化還原態的調節、藥物的作用效應以及脫毒機制方面十分重要。有文獻報道不同細胞亞群在應對氧化應激時的GSH水平存在差異,因此,適用于流式細胞分析和自動化熒光檢測的GSH檢測探針的開發非常重要。比較于常用的GSH檢測探針:單溴二胺(mBBr,MX5315)、單氯二胺(mBCl,MX5318),以及Thiotracker™ Violet,ThiolTrace™ Violet 500是一款更明亮和更穩定的細胞內硫醇探針(Thiol probe),用于監測胞內硫醇。由于GSH代表細胞內的絕大多數游離硫醇,因此,ThiolTrace™ Violet 500能用來評估細胞內GSH的水平。
優勢:
1、比mBCl和其他常用的胞內硫醇染料(比如:Thiotracker Violet)至少明亮10×;在含生長因子的細胞培養基內,ThiolTrace Violet 500比Thiotracker Violet的熒光強度高10-100倍(見附圖I)。
2、能用紫外(UV)或405nm波長激發,最大發射波長~525nm(見附圖II)。
3、能用醛類固定和0.5% Triton X-100透化。
4、能用于多通路分析,包括細胞毒性研究。
5、兼容于各種稀釋溶液包括含血清的細胞培養基。
6、操作簡單,只需37℃孵育30min即可進入細胞內;
7、適用于多種檢測方法,包括:流式細胞術、HCS成像和落射熒光顯微鏡。

